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線性范圍寬達4-256倍:翼和試劑盒的定量能力解析
發布時間: 2026-09-11 點擊次數: 13次在科研實驗中,我們不僅需要知道樣本是"陽性"還是"陰性",很多時候還需要精確知道目標基因的表達量是多少。這就要求檢測試劑盒具有良好的線性范圍和定量能力。上海翼和生物的端粒酶催化亞基TERT基因表達檢測試劑盒,線性范圍寬達4倍至256倍稀釋,定量能力究竟有多強?
什么是線性范圍?線性范圍是指檢測結果與樣本濃度之間呈良好線性關系的濃度范圍。在線性范圍內,我們可以通過標準曲線精確計算樣本的濃度。線性范圍越寬,說明試劑盒能檢測的濃度范圍越大,適用性越強。
對于端粒酶檢測來說,不同樣本的TERT基因表達量可能差異很大——腫瘤細胞中表達量很高,而某些低表達細胞中表達量很低。如果線性范圍不夠寬,就可能出現高濃度樣本超出線性范圍、低濃度樣本檢測不到的情況。
翼和生物的線性驗證方案為了驗證試劑盒的線性范圍,翼和生物設計了嚴謹的實驗:將人陽性標準品細胞株(293T)的cDNA做2倍梯度稀釋,共設置12個稀釋梯度(1-2048倍),每個濃度做3個重復。
驗證結果:4-256倍稀釋呈良好線性實驗結果顯示,TERT基因和內參基因GAPDH在4倍至256倍稀釋范圍內,檢測結果呈良好的線性關系:
• TERT基因:標準曲線相關系數R2=0.9973,擴增效率101.75%
• GAPDH內參:標準曲線相關系數R2=0.9972,擴增效率93.69%
這兩個指標都符合可接受標準(R2≥98%,擴增效率90%-110%)。
寬線性范圍的意義4倍到256倍的線性范圍意味著什么?這意味著:
1. 高表達樣本無需多次稀釋:對于端粒酶活性很高的腫瘤細胞或胚胎干細胞,4倍稀釋后就能在線性范圍內準確定量,不需要反復摸索稀釋倍數。
2. 低表達樣本也能檢測:256倍稀釋后仍能準確定量,說明試劑盒的靈敏度很高,對于低表達的樣本也能可靠檢測。
3. 定量結果準確可靠:在線性范圍內,濃度和Ct值呈嚴格的線性關系,通過標準曲線計算的濃度值準確可靠。
翼和生物的技術優勢能達到如此寬的線性范圍,得益于翼和生物的技術創新:
• 兩套檢測系統信號增強:針對TERT基因設計兩對定量引物和探針,混合后進行多重定量,顯著提高了靈敏度,使低濃度樣本也能被檢測到。
• TaqMan探針法:探針法的背景熒光低,動態范圍寬,能在很寬的濃度范圍內保持良好的線性。
• 優化的反應體系:經過反復優化的反應體系和擴增程序,保證了在寬濃度范圍內的高效擴增。
無論是高表達的腫瘤細胞,還是低表達的特殊樣本,翼和生物端粒酶檢測試劑盒都能給出準確的定量結果,為你的科研提供可靠的數據支持。
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