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支原體污染實驗室全流程防控 + 試劑盒檢測實操指南
發布時間： 2026-08-25 點擊次數： 83次支原體一旦在實驗室擴散，整批細胞、培養基全部報廢，清理消殺成本高，做好 “預防 + 定期檢測" 兩步走，杜絕污染。
一、實驗室防控關鍵點
1. 三區分離操作：試劑配制區、樣本加樣區、陽性質控專用操作臺，移液器、槍頭分開；
2. 操作順序：先陰性→待測樣本→最后陽性質控，陽參單獨移液器，全程濾芯槍頭；
3. 超凈臺紫外 30–45min 通風，實驗前后 75% 酒精擦拭臺面；
4. 新細胞、外購血清、胰酶入庫前必須先做支原體檢測，再入培養箱；
5. 培養箱水盤定期更換無菌水，每周消殺，阻斷氣溶膠傳播。
二、翼和試劑盒標準實操（BPMPro100 高敏款）
1. 樣本富集：2mL 細胞上清 4℃ 15000rpm 離心 10min，小心棄上清，加裂解液重懸；
2. 抽提加 IC 內標：每管加入 6μL 內部質控，監控提取效率；
3. Mix 配制：9μL 反應 Mix+1μL 探針引物，預留 1 孔損耗；
4. 每孔分裝 10μL Mix，加 15μL 石蠟油封層，加入 20μL 抽提 DNA 模板；
5. ABI 程序：94℃預變性 5min，兩階段擴增，65℃收集熒光；
6. 結果判讀：內參 Ct≤30 有效；樣本 FAM＜37.5 為陽性，≥37.5 陰性，3 復孔兩陽判定污染。
三、異常結果快速排查
1. 前處理陰性出現 FAM 擴增：抽提過程交叉污染；
2. 所有樣本內參 Ct＞30：核酸抽提效率低或 PCR 體系失效；
3. 陽參 Ct＞30 但內參正常：陽性質控 DNA 降解。
全套操作 SOP、儀器參數模板可聯系翼和技術領取，從防控到檢測一站式解決支原體隱患。
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主營產品：主要技術服務：細胞STR鑒定；支原體檢測；細胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
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