-
小鼠諾如病毒MNV的qPCR檢測方法
發布時間: 2026-01-14 點擊次數: 357次中國實驗動物學會2017年5月發布的團標T/CALAS 22—2017 《實驗動物 小鼠諾如病毒檢測方法》描述了小鼠諾如病毒的檢測方法。標準規定了小鼠諾如病毒(MNV)的檢測方法、試劑等本標準適用于小鼠諾如病毒的檢測。其中方法上包括ELISA、普通PCR、實時熒光定量PCR等方法。
小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV )生物學特點
GB14922—2022 《實驗動物 微生物、寄生蟲學等級及監測》中規定的免疫缺陷鼠中必須排除的病毒。小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV ) 也是目前實驗小鼠中感染率較高的一種病毒,有些實驗動物設施的感染率非常高。MNV會激活免疫系統,影響抗體檢測。小鼠諾如病毒是國標中免疫缺陷小鼠的必檢項目。
小鼠諾如病毒屬于杯狀病毒科 諾如病毒屬,與人源諾如病毒的生物學及遺傳相似。2003年該病毒從小鼠中發現,后來受到越來越多的關注,關于諾如病毒感染的研究也逐步受到重視。鼠的MNV能通過接種細胞進行增殖,但是人類的諾如病毒不能通過細胞培養增殖。MNV基因組長約7.5kb,為正義單鏈RNA。
小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV )感染后的影響
大部分實驗小鼠對此病毒易感,雖然普通小鼠受感染無明顯發病癥狀,但可出現短暫、輕度的生長遲緩。但是實驗小鼠感染了MNV可能對實驗結果產生一定影響或偏倚,輕則食欲,也可能影響繁殖,特別是免疫缺陷的小鼠感染后可能會導致小鼠死亡。而且可出現按持續性感染,持續數月,通過糞便排毒,引起大范圍感染。
感染后可影響免疫能力,破壞免疫及代謝研究結果,通過影響基因表達等因素影響藥效、毒理評估等。
小鼠諾如病毒 ( Murine Norovirus, MNV )的檢測方法
傳統的病毒檢測用 ELISA 的方法檢測病毒抗體,但是由于 ELISA 的方法容易出現抗體交叉反應導致出現假陽性,并且對于免疫缺陷小鼠來說無法產生相應的抗體,所以需要有新的檢測方法來完成病毒的檢測。并且核酸病毒的增殖比抗體出現的時間更早,更易于早發現、早處理。
翼和生物開發了小鼠諾如病毒的qPCR熒光定量檢測試劑盒,該試劑盒中HEX通道可鑒定樣本是否感染了小鼠諾如病毒MNV。檢測流程:一般采集糞便或者其他樣本,用翼和DNA/RNA共提取試劑盒提取諾如病毒RNA,提取好的核酸直接取樣5微升進行上樣檢測。PCR檢測過程中需要設置陰性對照NTC和陽性MNV對照,確保檢測的流程沒有出現假陽性和假陰性。因為翼和的提取試劑盒中含有內參質控品(外源基因組),可以質控整個提取過程,所以在最終的檢測數據中CY5通道可以看到擴增曲線。
該試劑盒靈敏度高,特異性強,成本降低,操作簡單。



產品分類

